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熒光PCR試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)過(guò)程假陽(yáng)性的原因和解決方法總結(jié)

更新時(shí)間:2024-10-14      瀏覽次數(shù):232

熒光PCR試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):


1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供 DNA 模板。


2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增巴戟天,與其他植物沒(méi)有交叉反應(yīng)。


3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。


4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。


5. PCR試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。


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現(xiàn)象:空白對(duì)照出現(xiàn)條帶

可能原因:


1、引物設(shè)計(jì)不適,與目的序列具有同源性。


2、試劑污染:水、移液槍等被核酸污染。


3、樣品間出現(xiàn)交叉污染。


解決方法:


1、實(shí)驗(yàn)儀器高壓滅菌。


2、實(shí)驗(yàn)試劑(酶除外)高壓滅菌,離心管槍頭一次性使用。


3、規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作。


4、假陽(yáng)性可通過(guò)巢式 PCR 解決,或者使用特異性較高的試劑盒擴(kuò)增。


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